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Western Blot 五十劫系列之二—無蛋白封閉液救你于水深火熱之中
發布時間:2022/05/23 點擊數:688

一提到WB封閉液,人們首先想到的就是脫脂奶粉和BSA,其封閉原理就是利用封閉液中的蛋白成分以吸附的方式結合于膜表面的空白間隙,從而避免一抗的非特異性結合。事實上,除了常規蛋白質配方的封閉液之外,無蛋白-純化學配方的封閉液也具有很強大的應用前景,下面小編給您墻(liang)裂(xin)安(tui)利(jian)一款無(wu)蛋白封閉緩沖液(ye)(BlockPRO protein-free Blocking Buffer)

其(qi)主要成分為碳氫化(hua)合(he)物,碳氫基團以疏水性作用力結合(he)PVDF膜或(huo)NC膜。


優(you)點(dian)

· 無蛋白配方:杜絕封閉液與蛋白樣品之間的相互作用,特別適合磷酸化蛋白檢測

· 封閉更有效:小分子結構小,空間位阻小,有利于充分封閉目標蛋白周圍膜空間,又不遮蓋目標蛋白區域

· 高信噪比:提供比傳統封閉緩沖液更好的特定信號和更少的背景噪聲

· 節省抗體用量:應用本產品稀釋一抗,可增大稀釋比例,同樣獲得高信噪比


優勢

1、小分子封閉(bi)更有(you)效,提升靈(ling)敏度,降低背景噪聲


Sample: THP-1 cell lysates ; Blocking time: 1 hour ;Target antigen: pAMPK ; Exposure time: 30 sec

相(xiang)較于脫脂奶粉、BSA、Casein等蛋白質配(pei)方封閉緩沖液,BlockPRO封閉緩沖液具有更好的信(xin)號強度


2、無(wu)蛋白配方,不易滋生霉菌,延長抗(kang)體使用次數

BlockPRO封(feng)閉(bi)緩(huan)沖液為純(chun)化學(xue)配(pei)方,不含蛋白質,稀釋抗(kang)體可延長保存時間,抗(kang)體重(zhong)復使用次(ci)數增加(jia)


使(shi)用此款無蛋白封閉液,幫助(zhu)您解決(jue)以下問(wen)題:


1、使用脫脂奶粉作為(wei)磷(lin)蛋白檢(jian)測的封閉液(ye),為(wei)什么檢(jian)測不到條(tiao)帶??

問題(ti)分析及(ji)解(jie)決辦法:磷蛋(dan)白(bai)信號(hao)本來(lai)就(jiu)不強,脫脂(zhi)奶(nai)粉(fen)中含有磷蛋(dan)白(bai),產生了更多(duo)的非特異(yi)性(xing)信號(hao);無(wu)蛋(dan)白(bai)封閉液(ye)為(wei)純化學配方,杜(du)絕封閉液(ye)與蛋(dan)白(bai)樣(yang)品之間的相互作用(yong),使用(yong)更有效


2、使(shi)用BSA作為封閉液,為什么有的(de)時候會出現背景太(tai)高,特異性信號弱的(de)現象?

圖片來(lai)自(zi)丁香園


問題分析及(ji)解決(jue)辦法:BSA蛋(dan)(dan)白分(fen)子(zi)量較大(da),由于(yu)空間(jian)位(wei)阻(zu)可能在目(mu)的蛋(dan)(dan)白鄰近空隙(xi)進行過度填充(chong),遮蓋(gai)部分(fen)目(mu)的蛋(dan)(dan)白信(xin)號;無蛋(dan)(dan)白封閉液主要(yao)成分(fen)為(wei)化學合成的小(xiao)分(fen)子(zi),空間(jian)位(wei)阻(zu)小(xiao),有利于(yu)充(chong)分(fen)封閉目(mu)標蛋(dan)(dan)白周圍膜空間(jian),又不遮蓋(gai)目(mu)標蛋(dan)(dan)白區域


3、用(yong)BSA或脫脂奶粉稀釋的(de)抗體,放冰箱(xiang),第二次使用(yong)的(de)時候發現臭了

問題分析及解決辦法:封閉液中含有的蛋白容易滋生霉菌,即使放冰箱也不能長時間保存抗體;無蛋白封閉液中不含易滋生霉菌成分,可延長抗體保存時間



一(yi)款無蛋白、適用范圍(wei)廣、具有高信噪比(bi)的封閉緩沖(chong)液,你值得(de)擁有!