前情提要 

2024年1月，Iovance Biotherapeutics公司開發(fa)的(de)(de)TIL療(liao)法(fa)lifileucel成(cheng)功獲批上(shang)市，用于(yu)治療(liao)晚期黑色素瘤，為T細胞治療(liao)實體瘤的(de)(de)細胞療(liao)法(fa)迎來(lai)曙光(guang)。

與依(yi)賴血(xue)液循環實現治療(liao)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)療(liao)法相(xiang)比，TIL的(de)靶向特(te)異性是該療(liao)法的(de)優勢(shi)。TIL療(liao)法利用患者自身的(de)免(mian)(mian)(mian)疫(yi)(yi)(yi)系統來識別并攻(gong)擊癌細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，包括(kuo)已經滲透到腫(zhong)瘤中(zhong)的(de)特(te)定免(mian)(mian)(mian)疫(yi)(yi)(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，這(zhe)類(lei)免(mian)(mian)(mian)疫(yi)(yi)(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)具有(you)針對癌細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)天然識別能(neng)(neng)力和(he)攻(gong)擊能(neng)(neng)力，通過提取、擴增并重新注入這(zhe)些免(mian)(mian)(mian)疫(yi)(yi)(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，可以有(you)效增強(qiang)患者的(de)免(mian)(mian)(mian)疫(yi)(yi)(yi)反(fan)應，從而攻(gong)擊并消滅(mie)腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)。

然(ran)而，TIL的獨特性(xing)在于(yu)能夠從(cong)(cong)患者病(bing)灶切除腫(zhong)瘤組(zu)織并進行(xing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)分(fen)離，這讓獲得(de)(de)TIL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)并進行(xing)大規模生產變得(de)(de)更為困難，因此更需從(cong)(cong)腫(zhong)瘤組(zu)織中分(fen)離出高質量的TIL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。性(xing)能溫和(he)的Collagenase被應(ying)用于(yu)從(cong)(cong)組(zu)織中提取單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，其中Nordmark Collagenase NB6 GMP已(yi)支(zhi)持(chi)多款TIL療法項目(mu)進入臨床實驗階段。

NB6 GMP用于從實體瘤組織中提取TILs

腫(zhong)瘤浸潤性淋巴細(xi)胞（TIL）療(liao)法的重點在于利用患者自(zi)身的免疫(yi)系統對抗癌癥。此過程步驟之一(yi)是從實體瘤中提取高質量的TIL細(xi)胞。以(yi)下以(yi)胰腺腫(zhong)瘤舉(ju)例說明：

1、將手術中獲(huo)取的胰(yi)腺組織(zhi)轉(zhuan)移到(dao)培養皿中；

2、添(tian)加(jia)5ml的(de)Collagenase NB6 GMP溶液（0.2pzu/ml）于50ml離心管中（Tube A）并置于冰上(shang)；

3、添加(jia)適量Collagenase NB6 GMP溶液于(yu)培養皿中，覆蓋胰腺組織即可；

4、用無菌(jun)手術刀和鑷子將胰腺腫瘤(liu)切(qie)碎(sui)(sui)，使切(qie)碎(sui)(sui)的腫瘤(liu)組織長(chang)度不超(chao)過(guo)3mm；

5、將胰腺腫瘤組(zu)織碎(sui)片轉移到Tube A中(zhong)，確保(bao)所有組(zu)織碎(sui)片浸(jin)沒在消化(hua)液中(zhong)；

6、37℃，震蕩孵育20min；

7、添加大于20ml的預冷PBS至Tube A中并混(hun)勻；

8、使(shi)用70μm細(xi)胞過(guo)濾器將Tube A中(zhong)的(de)溶液過(guo)濾并轉移(yi)到新的(de)50ml離心管中(zhong)（Tube B）；

9、Tube B于(yu)4℃，300g離心5min；

10、移除(chu)Tube B中(zhong)的上清(qing)液，使(shi)用培養基(ji)重懸細胞；

11、細胞接種(zhong)培養(yang)；

12、體外(wai)篩選(xuan)特異性(xing)靶向(xiang)胰腺(xian)腫瘤的TIL。

Nordmark膠原(yuan)酶在組織解離中的應用范圍

除上述應用外，Nordmark膠原酶可被應用于從不同組織類(lei)型中分離目的細胞，部分細胞類(lei)型如下表所示：

Nordmark提(ti)供(gong)高(gao)質量(liang)膠原酶NB產(chan)(chan)品，適用于各種組織類型(xing)的(de)單細胞解離；Nordmark提(ti)供(gong)的(de)GMP等級膠原酶產(chan)(chan)品，可(ke)進行臨(lin)床用途的(de)細胞解離；嚴格的(de)生產(chan)(chan)標準保障可(ke)靠的(de)批間一致性(xing)和(he)優異的(de)性(xing)能。

Nordmark膠(jiao)原酶NB旨在獲得(de)高產量的(de)活細胞(bao)，希(xi)望(wang)您(nin)能在上(shang)述表(biao)格中找到(dao)您(nin)希(xi)望(wang)分(fen)離的(de)細胞(bao)類型(xing)。若您(nin)找不(bu)到(dao)您(nin)的(de)應用或(huo)想了解更多信息(xi)，歡迎(ying)與我們(men)聯系！