QKine，總部位于英國劍橋，是一家通過 ISO9001:2015 認證的公司。作為蛋白質創新的指引者，產品范圍涵蓋了多個應用領域，旨在提高您研究的可重復性。QKine積極支持并創新于新興領域，如類器官和器官芯片、細胞農業、再生醫學、合成水凝膠和生物打印等。

本期主要討論神經誘導和干細胞維持用到的因子清單及QKine DKK-1因子相較于其他供應商的優勢。下期《QKine--用于(yu)神經干細胞(bao)和腦神經類器官培(pei)養的營養因(yin)子（下）》將討論各種神經分化、大腦的3D細胞、神經球體、器官芯片和生物打印技術，敬請期待。

01   改進的神經營養因子用于神經干細胞和類器官培養

高純度、可(ke)(ke)靠的(de)(de)(de)生長(chang)因子和(he)細(xi)胞因子對(dui)于生成和(he)維持(chi)強健、可(ke)(ke)重復及(ji)生理相關的(de)(de)(de)神經細(xi)胞群體至(zhi)關重要(yao)。選擇無動(dong)物來源的(de)(de)(de)蛋(dan)白質用(yong)于敏感(gan)的(de)(de)(de)干細(xi)胞分化方案，可(ke)(ke)通(tong)過防(fang)止與共純化的(de)(de)(de)內源性生長(chang)因子的(de)(de)(de)污(wu)染來減(jian)少(shao)不確(que)定性，并促進向臨床前和(he)高通(tong)量應用(yong)的(de)(de)(de)轉化。

Qkine在英國劍橋(qiao)的(de) ISO9001:2015 認證設施(shi)中(zhong)制(zhi)造(zao)高生物(wu)活性(xing)、高純度、無動物(wu)來(lai)源的(de)重組(zu)蛋白質(zhi)。每個生長因子(zi)和細胞因子(zi)都在嚴格(ge)的(de)質(zhi)量框架內制(zhi)造(zao)，并遵循九點質(zhi)量承諾，包括對每批(pi)次進(jin)行全面(mian)的(de)質(zhi)量控制(zhi)測試，確保蛋白質(zhi)量或EC50沒有批(pi)次間差異。

作為生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)(xing)保(bao)證(zheng)(zheng)的(de)一部分，與主要供應商進(jin)行定(ding)(ding)量生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)(xing)比較研(yan)(yan)究，以確保(bao)每個蛋白質的(de)生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)(xing)等同(tong)或更高。用(yong)于轉化研(yan)(yan)究的(de)高合規(gui)性(xing)(xing)產品文件，包括詳細的(de)批次(ci)特定(ding)(ding)的(de) COO（原產地證(zheng)(zheng)明）、COA（分析證(zheng)(zheng)書）和無(wu)動物(wu)來源認證(zheng)(zheng)，均可提供。

我們(men)結合生(sheng)(sheng)產工(gong)藝與蛋白(bai)質(zhi)(zhi)工(gong)程技術，解決基礎的(de)(de)生(sheng)(sheng)物學、質(zhi)(zhi)量和放大(da)挑戰，提供(gong)更可靠的(de)(de)研(yan)究(jiu)和生(sheng)(sheng)物制(zhi)造(zao)工(gong)具，包括新的(de)(de)無(wu)動物來源蛋白(bai)質(zhi)(zhi)、熱(re)穩定和無(wu)蛋白(bai)標簽的(de)(de)生(sheng)(sheng)長因子及相關蛋白(bai)質(zhi)(zhi)。

02   神經干細胞

神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)干細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（NSCs）是多能(neng)干細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，能(neng)夠分化為神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)譜系(xi)內的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。NSCs產(chan)生特(te)定(ding)的(de)前體(ti)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，這些前體(ti)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)是神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)元(yuan)或膠(jiao)(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)前體(ti)。這些特(te)定(ding)的(de)前體(ti)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)具有(you)增殖和分化為特(te)定(ding)專門細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)能(neng)力(li)，但其自我更新能(neng)力(li)有(you)限。神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)元(yuan)前體(ti)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)產(chan)生神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)系(xi)統的(de)基(ji)本功能(neng)單元(yuan)——各種類(lei)型的(de)神(shen)經(jing)(jing)(jing)(jing)元(yuan)。膠(jiao)(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)前體(ti)則(ze)產(chan)生支持細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，如少突膠(jiao)(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（oligodendrocytes）、星形膠(jiao)(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（astrocytes）和施旺細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（Schwann cells）。

神(shen)(shen)(shen)經發生和(he)(he)神(shen)(shen)(shen)經干細胞受到內(nei)在的(de)(de)(de)(de)遺(yi)傳和(he)(he)表(biao)觀(guan)遺(yi)傳因素(su)以(yi)及外在刺激的(de)(de)(de)(de)調控。這些(xie)因素(su)的(de)(de)(de)(de)破壞會導(dao)致與年齡(ling)相關的(de)(de)(de)(de)認知障(zhang)礙(ai)，包括阿爾茨(ci)海默病(bing)和(he)(he)帕(pa)金森病(bing)；神(shen)(shen)(shen)經和(he)(he)精神(shen)(shen)(shen)障(zhang)礙(ai)，包括抑(yi)郁癥和(he)(he)精神(shen)(shen)(shen)分裂癥；以(yi)及癌癥。由于神(shen)(shen)(shen)經組織的(de)(de)(de)(de)復(fu)雜性和(he)(he)適(shi)合的(de)(de)(de)(de)體外模型系統(tong)的(de)(de)(de)(de)缺乏，這些(xie)疾(ji)病(bing)的(de)(de)(de)(de)研究傳統(tong)上較為困難。這導(dao)致了對(dui)NSCs作為研究神(shen)(shen)(shen)經發育、疾(ji)病(bing)機制和(he)(he)藥物篩選模型系統(tong)的(de)(de)(de)(de)興(xing)趣較大程度增加。幾種有前途(tu)的(de)(de)(de)(de)新(xin)細胞治療策略也使(shi)用干細胞衍(yan)生的(de)(de)(de)(de)神(shen)(shen)(shen)經元或膠質細胞。

03   提升生物活性蛋白質制造和創新標準

“BDNF（Qk050）和GDNF（Qk051）是神經培養實驗室每天使用的蛋白質，Qkine提供的BDNF和GDNF具有成本效益和生物活性，能夠生成人類運動神經元并長期維持其健康。”用戶Joshua Thomas 和 Felix Buchner，德國神經退行性疾病研究中心（DZNE）評價。

04   神經誘導和干細胞維持

神經(jing)誘導是將(jiang)誘導多能干細胞(bao)(bao)（iPSCs）或(huo)胚胎干細胞(bao)(bao)（ESCs）引導至(zhi)神經(jing)譜系(xi)(xi)的(de)(de)初始(shi)步驟。先將(jiang)iPSCs或(huo)ESCs培養在補充(chong)了成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)(zi)-2（FGF-2）和其他生(sheng)長(chang)因子(zi)(zi)的(de)(de)培養基(ji)中，直至(zhi)它們達(da)到融合狀態，后(hou)將(jiang)其傳代至(zhi)Matrigel或(huo)其他定義的(de)(de)基(ji)質上，以(yi)(yi)生(sheng)成(cheng)NSCs和神經(jing)前體(ti)細胞(bao)(bao)。標準協(xie)議包(bao)括使用骨形(xing)態發生(sheng)蛋(dan)白（BMP）抑(yi)制(zhi)劑(ji)如(ru)noggin、小分(fen)子(zi)(zi)SMAD抑(yi)制(zhi)劑(ji)如(ru)dorsomorphin以(yi)(yi)及Wnt抑(yi)制(zhi)劑(ji)如(ru)DKK-1，以(yi)(yi)抑(yi)制(zhi)促(cu)進非(fei)神經(jing)譜系(xi)(xi)的(de)(de)信號(hao)通路。

FGF-2和表皮生長因子（EGF）是維持NSCs多能性的主要生長因子。熱穩定的FGF-2，如FGF2-G3（Qk053），可用于無需周末維護的干細胞維持，或在分化前改善細胞的均一性，以提高特定細胞類型的產量。其他生長因子如血管內皮生長因子（VEGF）或神經生長因子（NGF）也可能促進神經干細胞的增殖和存活。

涉(she)及因子產品(pin)列表

05   使用與Dickkopf相關的蛋白1（DKK-1）進行神經分化

Qkine生產市售的無動物(wu)來源的生物(wu)活性 DKK-1，用(yong)于可重復的干細胞培養及相關應用(yong)。

與(yu)Dickkopf相關的蛋白1（DKK-1）是一種有(you)效的Wnt通路(lu)拮抗劑，用(yong)于(yu)(yu)控制細(xi)胞(bao)命(ming)運、自我更新和分(fen)化。重(zhong)組人DKK-1應用(yong)于(yu)(yu)干細(xi)胞(bao)分(fen)化方案(an)，尤其是在神經(jing)和成骨途(tu)徑(jing)中，并用(yong)于(yu)(yu)模擬(ni)癌(ai)癥中失調的Wnt信號。

Qkine近期開發了(le)一種無動(dong)物(wu)來源(yuan)（AOF）的(de)(de)DKK-1，以支(zhi)持轉(zhuan)化(hua)和敏(min)感的(de)(de)研(yan)究。使用高純(chun)度(du)的(de)(de)AOF蛋白(bai)(bai)通(tong)過消除(chu)微量動(dong)物(wu)成分的(de)(de)污染或非靶向(xiang)效應以及共純(chun)化(hua)的(de)(de)哺乳動(dong)物(wu)蛋白(bai)(bai)表達(da)系統自然分泌的(de)(de)相關蛋白(bai)(bai)，提(ti)高了(le)可重復性。

·  為了確定哺乳動物和細菌表達的DKK-1的相對生物活性，直接比較了Qkine AOF DKK-1（Qk068）與主要供應商提供的哺乳動物表達的DKK-1在Wnt-3a響應的螢火蟲熒光素酶報告基因檢測中的生物活性。結果表明，這些蛋白的生物活性是相當的（a）。

·  Qkine的DKK-1的活性還與市售的細菌表達DKK-1進行了比較。在報告基因檢測中，這種蛋白未顯示出對Wnt活性的抑制，表明來自替代供應商的DKK-1沒有生物活性（b）。

定量熒光素酶報告(gao)基(ji)因檢測顯示，QkineAOF DKK-1和哺(bu)乳動物(wu)表達的DKK-1具有相同的生物(wu)活性。

HEK293T細胞被三(san)次重(zhong)復處理，使用DKK-1的系列稀釋液和標準(zhun)濃度的Wnt-3a處理24小時。

a.觀察到細菌表達的無動物來源（AOF）DKK-1（Qkine，綠色Qk068）和哺乳動物表達的DKK-1（供應商B，黑色，Peprotech120-30）的生物活性，其EC50分別為7.8ng/ml（301pM）和7.5ng/ml（291pM）。

b. 使用替代供應(ying)商(shang)（供應(ying)商(shang)C，藍色，ProSpecPRO-1566）的(de)細菌(jun)表達DKK-1未(wei)檢測到(dao)生物活(huo)性。請注意，供應(ying)商(shang)未(wei)提(ti)供此蛋白的(de)生物活(huo)性信息。

比較生物活性數據表明，Qkine的DKK-1（Qk068）與來自另一主要供應商的哺乳動物表達的DKK-1具有相同的生物活性。因此，Qkine提供了高質量無動物來源DKK-1的可靠來源，可用于高度定義且可重復的干細胞、神經細胞、成骨細胞培養及其他應用。

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憑借強大的制造流程，QKine生產高純度、高品質、無動物成分的生長因子、細胞因子和其他復雜蛋白質，目前已上架近100種因子，新的產品還在不斷上架，其中約30%的產品目錄由獨特的產品組成，包括無標簽的熱穩定FGF-2（FGF2-G3），無動物、化學成分限定的TGF-β1，用于的干細胞培養基，以及無動物成分的HGF（NK1）。

QKine 可以(yi)通過(guo)提供批量預訂、批量訂單、定(ding)制(zhi)裝(zhuang)瓶和(he)(he)質量保證（QA ）來支(zhi)持規模化和(he)(he)商業(ye)制(zhi)造。

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QKine--用于人造肉與細胞農業的因子

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