人IGF-1蛋(dan)白用于維持人類多能干細(xi)(xi)胞 (iPSC),是缺乏(fa)胰島素時細(xi)(xi)胞生長所需的(de)。IGF-1 促進多種細(xi)(xi)胞類型的(de)增殖(zhi),包括胚胎干細(xi)(xi)胞 (ESC) 和間充質(zhi)干細(xi)(xi)胞 (MSC)。
Qkine IGF-1(Qk047)是一種高純度且具有生物活性的 8 kDa 蛋白,Qkine 生長因子不含動物來源 (AOF) 和載體蛋白 (CF),可實現一致的干細胞培養。
1. 高純(chun)度人類(lei)IGF-1蛋白(Uniprot:P05019)
2. 1.8 kDa(二(er)聚體)
3. >98%,通過 SDS-PAGE 定量密度測定
4. 在大腸(chang)桿菌中表達(da)
5. 無動物來源(AOF)和無載體蛋白
6. 在英國劍橋實驗室制造
7. 乙腈、TFA 凍干(gan)
8. 以(yi)>50 μg/ml 的濃度重新懸浮于(yu)無菌(jun)過濾水中,如(ru)有需要,添加載體蛋白(bai),制備一次性使用(yong)的等分(fen)試(shi)樣(yang)并冷凍儲存于(yu) -20 °C(短期)或(huo) -80°C(長期)
9. 替代蛋白質名稱:Insulin-like Growth Factor-I, Somatamedin-C, Mechano Growth Factor (MGF)
10. 物(wu)(wu)種(zhong)反應性:人類(lei)。物(wu)(wu)種(zhong)相似(si)性:鼠(shu)-94%;大鼠(shu) -96%;牛 -100%;豬 -100%
11. 替代蛋白質:重組人IGF-1 LR3蛋白(Qk041)
12. 質(zhi)譜法:具有預期(qi)質(zhi)量的單一物種
13. 庫存瓶回收率:>95%
14. 內毒素:<0.005 EU/μg 蛋白(低于檢測水平)
使用Promega血清反應元件熒光素酶報告基因檢測(*),在轉染的MCF-7細胞中測定IGF-1活性。EC50 = 3.5 ng/ml (0.45 nM)。用不同梯度稀釋的IGF-1處理細胞4小時,重復三次。測定螢火蟲熒光素酶活性,并將其與對照海腎熒光素酶活性進行標準化。數據來自Qk047批號#104331。*Promega pGL4.33[luc2P /SRE/Hygro] #E1340
Qkine IGF-1 在(zai)培養(yang)基中可保持生物(wu)活(huo)性(xing)(xing) 7 天。生物(wu)活(huo)性(xing)(xing)采(cai)用 IGF-1 反應性(xing)(xing)螢火(huo)蟲(chong)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)酶報告基因檢測(ce)(ce)進(jin)行(xing)測(ce)(ce)定。轉(zhuan)染的(de) HEK293T 細(xi)胞(bao)用梯度(du)稀釋的(de) IGF-1 處(chu)理 4 小時,該 IGF-1 已(yi)在(zai)條(tiao)件(jian)培養(yang)基中預(yu)培養(yang) 7 天。測(ce)(ce)量螢火(huo)蟲(chong)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)酶活(huo)性(xing)(xing),并(bing)將其與對照海腎熒(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)酶活(huo)性(xing)(xing)進(jin)行(xing)標準化。
IGF-1 蛋(dan)白在非還(huan)原(yuan) (NR) 條(tiao)件和還(huan)原(yuan) (R) 條(tiao)件下均(jun)以 10 kDa 的單一條(tiao)帶(dai)(dai)遷移。未(wei)觀察到污染(ran)蛋(dan)白條(tiao)帶(dai)(dai)。純化的重組蛋(dan)白 (3 μg) 在還(huan)原(yuan) (+β-巰基乙(yi)醇,R) 和非還(huan)原(yuan) (NR) 條(tiao)件下采用(yong) 18% w/v SDS-PAGE 進行分離,并用(yong)考馬斯亮藍 R250 染(ran)色(se)。數據來(lai)自 Qk047 批(pi)次 #104331。
? iPSC多(duo)能性的維持
? 細胞培(pei)養基(ji)優化及培(pei)養基(ji)中胰島素的替(ti)代
IGF-1近期文獻
1. Kowalczyk K, Krawczyk M, Krawczyk P. Clinical characteristics and treatment efficacy in patients with primary severe IGF-1 deficiency treated with recombinant IGF-1[J]. Frontiers in Pediatrics, 2024,12:1461163. DOI:10.3389/fped.2024.1461163
研(yan)究亮(liang)點:
? 早期開(kai)始治療(liao)的患(huan)者獲(huo)得更明顯(xian)的生(sheng)長改善(shan)
? 不(bu)同基因突變(bian)(如(ru)SHOC2、EXT2、線粒體(ti)病(bing)變(bian))對治療反應存在差異(yi),強調了(le)個體(ti)化治療的重要性
? 低血(xue)糖是常見的不良反應,尤其在(zai)治療(liao)初期(qi)需要密切監測
2. PengJX, Guan XY, Li GH, Zhong JL, Song JK, Xiao LL, Jin SH, Liu JG. Recombinanthuman insulin-like growth factor-1 promotes osteoclast formation andaccelerates orthodontic tooth movement in rats[J]. Journal of Applied OralScience, 2021, 29: e20200791. DOI:10.1590/1678-7757-2020-0791
研究亮點:
? 探討了(le)IGF-1在(zai)大(da)鼠正畸牙齒(chi)移動中(zhong)的(de)作(zuo)用。結果(guo)顯(xian)示,IGF-1明顯(xian)促進了(le)破骨細胞的(de)形成,增強了(le)骨吸(xi)收,從而加速了(le)牙齒(chi)的(de)移動
IGF是一(yi)類結構與(yu)(yu)胰島素相似(si)(si)的蛋(dan)白(bai)家族。IGF-1 具(ju)有(you)由二硫鍵連接的 A 鏈(lian)和 B 鏈(lian),與(yu)(yu)胰島素的相似(si)(si)性意味著它可(ke)以與(yu)(yu)胰島素受(shou)體低親和力結合 [1]。IGF-1 是生長激素 (GH) 的主要介質,對大多數(shu)細胞和組織(zhi)具(ju)有(you)生長促進作用(yong),包括骨骼肌、軟骨、骨、肝臟、腎臟、神經(jing)、皮膚、造血和肺(fei) [1]。IGF-1 通(tong)過(guo)(guo)與(yu)(yu) IGF1 受(shou)體 (IGF1R) 結合發(fa)揮其生物學(xue)效應,其作用(yong)通(tong)過(guo)(guo)與(yu)(yu)一(yi)組結合蛋(dan)白(bai) (IGFBPs) 相互作用(yong)進行調(diao)節,而(er)這些(xie)結合蛋(dan)白(bai)往往會抑制 IGF-1 的作用(yong) [2]。通(tong)過(guo)(guo) IGF1R,Ras-MAPK 和 PI3 激酶信(xin)號通(tong)路被激活,從而(er)增加細胞增殖和存活率 [2]。
IGF-1 可(ke)用于支(zhi)持人類胚(pei)胎干(gan)細胞 (ESC) [3] 和間充(chong)質干(gan)細胞 (MSC) 培養 [3, 4] 的維持。
[1] Laron Z. Insulin-like growth factor 1 (IGF-1): a growth hormone. Mol Pathol. 2001 Oct;54(5):311-6. doi: 10.1136/mp.54.5.311
[2] Werner H. The IGF1 Signaling Pathway: From Basic Concepts to Therapeutic Opportunities. International Journal of Molecular Sciences. 2023; 24(19):14882. doi.org/10.3390/ijms241914882
[3] Wang L, Schulz TC, Sherrer ES et al. Self-renewal of human embryonic stem cells requires insulin-like growth factor-1 receptor and ERBB2 receptor signaling. Blood 2007 Dec 1;110(12):4111-9. doi: 10.1182/blood-2007-03-082586
[4] Youssef A, Aboalola D and Han VK. The Roles of Insulin-Like Growth Factors in Mesenchymal Stem Cell Niche. Stem Cells Int. (2017) 9453108. doi: 10.1155/2017/9453108
QKine總(zong)部位(wei)于英(ying)國劍橋,是(shi)一家通過(guo) ISO9001:2015 認(ren)證的(de)公(gong)司(si)。作為蛋白質創新(xin)(xin)的(de)指(zhi)引(yin)者,產品范(fan)圍(wei)涵蓋了多(duo)個應用領域,旨在提高(gao)您研究(jiu)的(de)可重(zhong)復性。QKine積極支持并創新(xin)(xin)于新(xin)(xin)興領域,如(ru)類(lei)器(qi)官和器(qi)官芯片、細胞農業、再(zai)生醫學(xue)、合成水凝膠和生物打印等。
憑借強(qiang)大的(de)制造流程,QKine生產高(gao)純度、高(gao)品(pin)質(zhi)、無(wu)(wu)動(dong)物(wu)成分的(de)生長因子、細胞因子和其他(ta)復雜(za)蛋白(bai)質(zhi),其中約30%的(de)產品(pin)目錄(lu)由獨特的(de)產品(pin)組成,包(bao)括(kuo)無(wu)(wu)標簽的(de)熱穩定FGF-2 (FGF2-G3),首(shou)個無(wu)(wu)動(dong)物(wu)、化學成分限定的(de)TGF-β1,用于的(de)干(gan)細胞培養基,以(yi)及無(wu)(wu)動(dong)物(wu)成分的(de)HGF (NK1)。
QKine 可以通過提供批(pi)量(liang)預訂(ding)、批(pi)量(liang)訂(ding)單(dan)、定制裝瓶(ping)和質量(liang)保(bao)證 (QA) 來支(zhi)持規模化和商業(ye)制造。
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