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治(zhi)療性蛋(dan)白藥(yao)(yao)物(wu)的免疫(yi)反(fan)應(ying)對該(gai)藥(yao)(yao)物(wu)的臨床(chuang)表現如(ru)：藥(yao)(yao)代動(dong)力學、藥(yao)(yao)效學、安全(quan)性和療效均會產生不同(tong)程(cheng)度的影(ying)響(xiang)。而(er)抗藥(yao)(yao)物(wu)抗體(ti)（Anti-Drug Antibody，以下(xia)簡稱ADA）的檢(jian)測和分析是(shi)了解潛在免疫(yi)反(fan)應(ying)的有用工具。臨床(chuang)試(shi)驗期間觀察(cha)到(dao)的免疫(yi)反(fan)應(ying)信息(xi)，特別是(shi)ADA誘導的發生率或(huo)ADA反(fan)應(ying)對免疫(yi)系統的影(ying)響(xiang)對于任何治(zhi)療性蛋(dan)白質產品的開發都(dou)至關重要。因此治(zhi)療性蛋(dan)白藥(yao)(yao)物(wu)在進入臨床(chuang)試(shi)驗前對ADA存在與否以及(ji)ADA水平(ping)的檢(jian)測非常關鍵。

目(mu)前，常用的(de)(de)ADA免(mian)疫(yi)分(fen)(fen)析技術包括酶聯免(mian)疫(yi)吸(xi)附分(fen)(fen)析（ELISA）、電(dian)化學發光法（ECLA）、放射免(mian)疫(yi)沉淀分(fen)(fen)析（RIPA）、表面等(deng)離子(zi)體(ti)共振(zhen)（SPR）等(deng)。這些方法的(de)(de)檢測(ce)(ce)靈(ling)敏度受限于(yu)檢測(ce)(ce)背景以及反(fan)應(ying)性檢出能力，再加上ADA檢測(ce)(ce)具有復(fu)雜的(de)(de)生物基質（血清/血漿）、抗藥物特異性抗體(ti)含量低、與藥物結合親(qin)和力差、高濃度循(xun)環藥物的(de)(de)影響等(deng)特點給ADA免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)的(de)(de)檢測(ce)(ce)帶(dai)來(lai)了很大(da)挑戰，因此(ci)優化ADA免(mian)疫(yi)檢測(ce)(ce)過程的(de)(de)靈(ling)敏度、排除干擾(rao)、降(jiang)低檢測(ce)(ce)背景非常迫切。

ADA檢測的干(gan)擾因素

1、非特異性結合（Non-Specific Binding）

從(cong)(cong)使用的塑(su)料制(zhi)微孔板到(dao)顯影劑(ji)，每種(zhong)成分(fen)(fen)(fen)都可能導致(zhi)非特(te)(te)異性(xing)結合(he)從(cong)(cong)而影響分(fen)(fen)(fen)析(xi)靈敏度。優(you)化(hua)方法之一是選擇適當的分(fen)(fen)(fen)析(xi)緩(huan)沖液(ye)和用于防止非特(te)(te)異性(xing)結合(he)的封(feng)(feng)閉劑(ji)。多種(zhong)蛋白質可用作(zuo)封(feng)(feng)閉劑(ji)，然而，并沒(mei)有一款理想的封(feng)(feng)閉劑(ji)可以適用于所(suo)有分(fen)(fen)(fen)析(xi)。因此，需要(yao)測(ce)試(shi)幾種(zhong)封(feng)(feng)閉劑(ji)以優(you)化(hua)分(fen)(fen)(fen)析(xi)性(xing)能。

2、樣品基質中循(xun)環藥物(wu)的(de)影響

ADA檢測(ce)(ce)會(hui)受到(dao)樣品(pin)基(ji)質中(zhong)循(xun)環藥(yao)(yao)物(wu)(wu)的(de)(de)干擾，過量的(de)(de)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)與ADA 結合(he)，會(hui)造(zao)成(cheng) ADA 檢測(ce)(ce)假(jia)陰性(xing)(xing)結果。由于 ADA 在(zai)樣品(pin)中(zhong)會(hui)有兩種存(cun)在(zai)形式(shi)，即游離(li)(li) ADA和 ADA-藥(yao)(yao)物(wu)(wu)復合(he)物(wu)(wu)。游離(li)(li)的(de)(de) ADA 相對(dui)比較容易檢測(ce)(ce)到(dao)，而如果要檢測(ce)(ce)與藥(yao)(yao)物(wu)(wu)結合(he)的(de)(de) ADA，則需(xu)要對(dui)樣品(pin)進行預處理(li)，目前常用的(de)(de)方法之一是酸(suan)解離(li)(li)。酸(suan)解離(li)(li)是通過酸(suan)化(hua)樣品(pin)將 ADA-藥(yao)(yao)物(wu)(wu)復合(he)物(wu)(wu)解離(li)(li)成(cheng) ADA 和藥(yao)(yao)物(wu)(wu)，但(dan)這僅是在(zai)酸(suan)性(xing)(xing)條件下的(de)(de)存(cun)在(zai)形式(shi)，酸(suan)化(hua)后的(de)(de)樣品(pin)需(xu)要在(zai) pH 回(hui)到(dao)中(zhong)性(xing)(xing)時(shi)方可(ke)被用于 ADA 的(de)(de)檢測(ce)(ce)。

3、樣品基質中類風濕因子的干擾

類風濕(shi)因子（RF）是(shi)以(yi)變性的 IgG 的 Fc 片段為靶抗(kang)原的自身抗(kang)體，RF 不僅可(ke)與(yu)變性的 IgG 結合，也(ye)與(yu)自身 IgG 或異體 IgG反應，常對免疫檢測(ce)造成干擾(rao)。常規的處理方法是(shi)分析前在(zai)樣本中加入動物血清或IgG，或加入封(feng)閉阻斷試劑。

Lab bioreagents幫您應對ADA檢測的挑戰

ADA檢(jian)(jian)測專用封閉劑和樣本(ben)稀(xi)釋液,兼容MSD/Luminex檢(jian)(jian)測平臺,降(jiang)低(di)(di)免疫交叉反應,降(jiang)低(di)(di)基質干擾,實現高靈敏度(du)

Lab Bioreagents,通過人工智能 AI 技術篩選超過 2000 種化合物，同時采用動態動力學結合測試進行優化，開發了系列高品質的分析緩沖液和分析試劑盒。本組合套裝是經AI系統算法獲得的首推ADA檢測組合（StrongBlock III封閉液+ NGB I樣本稀釋液），可很大程度地提高藥物和抗藥物抗體間的特異性親和力，增強藥物耐受性, 降低交叉反應性和基質效應，改善分析性能。

產品特點

（1）專用(yong)的ADA 樣(yang)本稀釋(shi)液（NGB I），偏堿(jian)性緩沖(chong)液（pH=8）可以提供酸(suan)處理之后的酸(suan)性中(zhong)和反(fan)應

（2）封閉液（StrongBlock III），主要成(cheng)分(fen)為物理改性(xing)(xing)和化(hua)學修飾的BSA，異性(xing)(xing)抗體阻斷劑及一種(zhong)專有(you)成(cheng)分(fen)，有(you)效降低(di)交(jiao)叉反應性(xing)(xing)和基質(zhi)效應，提(ti)高信噪比

（3）提高藥物(wu)和(he)(he)抗(kang)藥物(wu)抗(kang)體間的特異性親(qin)和(he)(he)力，適用于低親(qin)和(he)(he)力ADA檢(jian)測

Lab bioreagents提供(gong)一系列(lie)高(gao)品質(zhi)免疫檢測Buffers，包括封閉(bi)液（StrongBlock buffer I/II/III）、藥代動(dong)力學檢測專用樣本稀釋(shi)液（LowBinding buffer III/IV/V）以(yi)及(ji)ADA檢測專用樣本稀釋(shi)液（NGB I/II）