Nordmark提供高質量膠原酶NB產品(pin)，特別適(shi)用(yong)于各種科研用(yong)途的(de)器(qi)官，組織的(de)單細(xi)(xi)胞解離；具(ju)有GMP無動物(wu)源等(deng)級，可進行臨床用(yong)途的(de)細(xi)(xi)胞解離。嚴格(ge)的(de)生產標準帶來可靠的(de)批間一致性和(he)優異的(de)性能(neng)。Nordmark膠原酶NB是(shi)旨在獲得高產量的(de)活細(xi)(xi)胞。

產品簡介

?   超過30年的(de)高質量膠(jiao)原酶專業供應，按照制藥級標(biao)準進行純化(hua)和(he)生產

?   組織細胞解離的(de)整體解決方案(an)：按照不同種屬、組織/器官、細胞類型進(jin)行分類

?   不同(tong)規格(ge)，純度(du)，活(huo)性的膠原酶以及中性水解酶

?   從科研級到無(wu)動(dong)物(wu)源GMP級別多重選擇(ze)，相關GMP產品已在FDA備案DMF

?   滿(man)足(zu)大多(duo)數(shu)組(zu)織(zhi)/器(qi)官的單細胞解離(li)需求(qiu)，包括提供敏感細胞解離(li)專(zhuan)用的溫和(he)解離(li)酶方案

?   提供(gong)優(you)化(hua)過(guo)的胰島專(zhuan)用(yong)細(xi)胞解離方案和產(chan)品

?   用戶使用友(you)好：提供優化過的細胞(bao)解離Protocol

?   高性(xing)價比：相同酶活性(xing)條件(jian)下價格與(yu)全(quan)球主流(liu)品牌相比具(ju)有明顯優勢

?   各類應用的大量文獻支持

應用領域

Nordmark提(ti)供高質(zhi)量膠原酶(mei)NB產(chan)品，特別適用于各種科研用途(tu)的(de)(de)器官(guan)，組織(zhi)(zhi)的(de)(de)單細胞解離(li)(li)；具有GMP無動物源(yuan)等級，可(ke)進行(xing)臨(lin)床用途(tu)的(de)(de)細胞解離(li)(li)。嚴格的(de)(de)生產(chan)標準帶來可(ke)靠的(de)(de)批間一致(zhi)性和(he)優異的(de)(de)性能(neng)。Nordmark膠原酶(mei)NB是旨在獲得高產(chan)量的(de)(de)活細胞。我(wo)們(men)希望您(nin)能(neng)在以下頁面找到您(nin)的(de)(de)應用，您(nin)可(ke)以按生物體種屬、器官(guan)或(huo)(huo)組織(zhi)(zhi)類型、細胞類型進行(xing)瀏(liu)覽。如果您(nin)找不到您(nin)的(de)(de)應用或(huo)(huo)您(nin)想了解更(geng)多信(xin)息，請與我(wo)們(men)聯系！

以(yi)上按照種屬/組織器官/細(xi)胞(bao)類別劃分(fen)細(xi)胞(bao)解(jie)離需(xu)求，均可提供對應膠原酶的型號規(gui)格(ge)和(he)推薦使(shi)用濃(nong)度(du)/方法以(yi)及有關參考(kao)文獻。

產品分類

Nordmark從科研到GMP級(ji)的全線(xian)組(zu)織細(xi)胞解(jie)離方案

更(geng)多組織(zhi)細胞解離應用(yong)方案請聯系上(shang)海曼博生物！

膠原酶Protocol分享系列（一）：人脂肪組織中血管基質成分SVF的提取

簡介

脂(zhi)肪(fang)(fang)組(zu)(zu)織(zhi)一(yi)直被認為是多種分(fen)(fen)化潛能的(de)(de)(de)多功能細胞(bao)類(lei)型包括干(gan)細胞(bao)的(de)(de)(de)豐富來(lai)源，一(yi)般可通過抽脂(zhi)的(de)(de)(de)方法收集。基(ji)質血管成分(fen)(fen)細胞(bao)(SVF) 從脂(zhi)肪(fang)(fang)組(zu)(zu)織(zhi)提取出來(lai)的(de)(de)(de)異質性混合細胞(bao)群體(ti)，含有(you)可塑性較高的(de)(de)(de)脂(zhi)肪(fang)(fang)組(zu)(zu)織(zhi)來(lai)源的(de)(de)(de)間(jian)充(chong)質干(gan)細胞(bao)，SVF從脂(zhi)肪(fang)(fang)組(zu)(zu)織(zhi)中(zhong)分(fen)(fen)離(li)后可用于直接應用或在進一(yi)步的(de)(de)(de)細胞(bao)分(fen)(fen)化以產(chan)生(sheng)特定的(de)(de)(de)細胞(bao)類(lei)型（文(wen)獻1）。今天(tian)小(xiao)編主要(yao)給大家分(fen)(fen)享的(de)(de)(de)是利用Nordmark 無動物(wu)源GMP級膠原(yuan)酶和中(zhong)性蛋白酶組(zu)(zu)合從脂(zhi)肪(fang)(fang)組(zu)(zu)織(zhi)中(zhong)分(fen)(fen)離(li)提取SVF的(de)(de)(de)實驗相關流程Protocol。

實驗準備

將0.4 PZU/ml無動物源GMP級膠原酶(mei)AF-1和0.2 DMC U/ml中性蛋白酶(mei)用(yong)乳酸鹽林格（LR）溶(rong)液(ye)(ye)(ye)溶(rong)解(jie)制(zhi)備酶(mei)工(gong)作(zuo)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)，請確(que)保酶(mei)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)液(ye)(ye)(ye)完全(quan)溶(rong)解(jie)且(qie)配(pei)好后一直(zhi)置(zhi)于冰上(shang)直(zhi)至使用(yong)。如果您計劃(hua)使用(yong)別的緩沖液(ye)(ye)(ye)，請確(que)保該(gai)緩沖液(ye)(ye)(ye)中Ca2?的濃度不低于2mM更(geng)有(you)助于膠原酶(mei)的活性發揮。

脂肪提取和洗滌

取用200ml原抽脂液(ye)(大概會(hui)析出(chu)50-100ml脂肪組(zu)織)，建議在吸脂液(ye)在新鮮的狀(zhuang)態(tai)立(li)即進行實驗。

1. 將抽脂液加熱(re)至(zhi)37 – 38℃

2. 將預熱過(guo)的(de)抽脂(zhi)液用LR溶液通過(guo)搖晃和傾析法清洗3次直(zhi)到脂(zhi)肪相(xiang)呈黃色，液體(ti)相(xiang)呈透明(淡粉色)。每次洗滌后將底(di)部的(de)水相(xiang)完(wan)全去除(chu)，然(ran)后再處理上層(ceng)相(xiang)的(de)脂(zhi)肪組織。

3. 第三次洗滌后(hou)靜(jing)置(zhi)至少5分(fen)鐘(zhong)。除(chu)了傾析法也(ye)可(ke)以通過(guo)在室溫下200g離心5分(fen)鐘(zhong)實現脂(zhi)肪的提取分(fen)離。

 一般離心后會有三(san)層：

?  第一(yi)層：脂肪組織

?  第二(er)層：膨(peng)脹的一些廢棄物

?  第(di)三層：紅細(xi)胞和細(xi)胞外基質(ECM)材料(liao)

4. 使用60ml導管尖端注射器抽吸洗凈和析(xi)出(chu)的上層脂肪組(zu)織，并將其轉移到適當的管或(huo)容器中。

SVF提取

獲得脂肪(fang)組織(zhi)后可以直接(jie)進行脂肪(fang)組織(zhi)消化步(bu)驟，主要步(bu)驟如下：

1. 在脂(zhi)(zhi)(zhi)肪(fang)組織樣品(pin)中(zhong)加(jia)入相同(tong)體積的酶(mei)溶液(ye)(脂(zhi)(zhi)(zhi)肪(fang)組織與酶(mei)溶液(ye)比例1:1)，即10g脂(zhi)(zhi)(zhi)肪(fang)組織處(chu)理加(jia)入10 ml含酶(mei)的LR溶液(ye)(GMP級(ji)別的0.4 PZ U/ml膠原酶(mei)AF-1和0.2 PZ U/ml中(zhong)性蛋白酶(mei)AF級(ji))。最終解離(li)溶液(ye)中(zhong)AF-1 GMP級(ji)終濃度(du)大致為0.2 PZ U/ml，中(zhong)性蛋白酶(mei)的終濃度(du)大致為0.1 DMC U/ml。

2. 解離(li)工作(zuo)溶液放置在(zai)搖床(chuang)中37℃恒(heng)溫以150轉/分(fen)搖50分(fen)鐘

3. 離心和SVF顆粒重懸

4. 600克離心10分鐘(zhong)會拿到三層溶液，分別(bie)為:

?  第一層(ceng)：分(fen)解的組織碎片

?  第(di)二層(ceng)：廢棄物

?  第三(san)層：SVF顆粒和(he)ECM材料

取上(shang)清，加入(ru)1ml LR溶(rong)液通過冷(leng)卻或稀釋辦(ban)法(fa)停止(zhi)酶(mei)解(jie)離工(gong)作，在這(zhe)過程中請確保細胞(bao)良好的(de)懸浮狀態(tai)。

5. 抽吸整個SVF懸浮(fu)細(xi)胞，通過(guo)(guo)400微米的(de)細(xi)胞過(guo)(guo)濾(lv)器過(guo)(guo)濾(lv)將SVF細(xi)胞與ECM材(cai)料分離(li)，并收集(ji)到一個新的(de)容器中。

6. 徹底搖勻樣品并(bing)根據需(xu)要進行細(xi)胞(bao)計數

Nordmark膠(jiao)原酶NB系列產(chan)品提供(gong)從科研(yan)到GMP級(ji)的全線組織細(xi)胞(bao)解(jie)離方(fang)案(an)，同時為(wei)方(fang)便用戶(hu)使用提供(gong)優(you)化(hua)過的細(xi)胞(bao)解(jie)離Protocol和(he)各(ge)類應用的大量文獻支持。以下是小編選(xuan)擇部分關(guan)于SVF以及脂(zhi)肪干細(xi)胞(bao)（ASC）的相關(guan)文獻清單分享：

更(geng)多應(ying)用文獻以及protocol請聯系上海曼(man)博生物。